پروتکل سریع و قابل اعتماد مزایای آشکاری را با نیروی کار ، تجربه و تجهیزات لازم کمتر ارائه می دهد – ScienceDaily

[ad_1]

برای نظارت و کمک به محدود کردن شیوع COVID-19 ، فقط در ایالات متحده هر روز به چندین میلیون آزمایش تشخیصی نیاز است. هنوز آزمایش گسترده ای برای آزمایش COVID-19 در ایالات متحده وجود ندارد و بسیاری از پروتکل های تشخیص بالینی به نیروی انسانی و مواد گسترده ای نیاز دارند که می تواند با کمبود تأمین روبرو شود و نگرانی های مربوط به ایمنی زیستی را ایجاد کند.

استاندارد طلای کنونی برای آزمایش تشخیصی COVID-19 در ایالات متحده ، که توسط مراکز کنترل و پیشگیری از بیماری های آمریکا (CDC) تهیه شده است ، آزمایشات کمی مولکولی مبتنی بر PCR (qPCR) است که وجود اسید نوکلئیک ویروسی را تشخیص می دهد. اگرچه بسیار دقیق است ، اما این آزمایشات مورد تأیید CDC نیاز به معرفهای تخصصی ، تجهیزات و آموزش کارکنان دارد. علاوه بر این ، بسیاری از کیت های تشخیصی که به سرعت تولید و به بازار عرضه می شوند ، محدودیت هایی در دقت ، هزینه و توزیع دارند. علاوه بر این ، سیستم های آزمایشی که در حال حاضر استفاده می شوند به راحتی برای یک سیستم عامل با عملکرد بالا مقیاس پذیر نیستند تا میلیون ها آزمایش مورد نیاز در روز را ارائه دهند.

با توجه به نیاز فوری به تولید معرفها و رویکردهای جایگزین برای تهیه آزمایش اسید نوکلئیک در مواجهه با افزایش تقاضا و کمبودهای احتمالی ، یک تیم تحقیقاتی از کالج پزشکی اشمیت در دانشگاه آتلانتیک فلوریدا یک پروتکل آزمایش COVID-19 ساده را تهیه کرده است که یک پروتکل جداگانه ارائه می دهد در مقابل محیط حمل و نقل استاندارد ویروسی یا جهانی (VTM). این پروتکل آزمون می تواند حداقل مقادیر SARS-CoV-2 را با استفاده از نمونه های سواب های دستگاه تنفسی فوقانی (بینی و گلو) و همچنین بزاق تشخیص دهد و می تواند در آزمایشگاه های تحقیقاتی با حداقل تجهیزات زیست شناسی مولکولی و تجربه.

صورتجلسه منتشر شده در PLOS ONE، از TRIzol (تیوسیانات گوانیدینیم / فنل-کلروفرم) برای تصفیه RNA ویروسی از انواع مختلف نمونه های بالینی استفاده می کند ، به حداقل اقدامات احتیاطی در سطح ایمنی زیستی احتیاج دارد و با توجه به حساسیت بالای آن ، می تواند به راحتی برای ادغام استراتژی های کاوش سازگار شود. با استفاده از این پروتکل ساده ، بلافاصله پس از جمع آوری نمونه ها در TRIzol شسته و RNA استخراج شد. نتایج نشان می دهد که این پروتکل ، اگر بیش از ریز ستون های تأیید شده CDC برای تصفیه RNA غشای سیلیکون با جداسازی مقادیر کمی RNA ویروسی و سلولی از انواع مختلف نمونه (سواب های بینی و گلو و بزاق) ، به همان اندازه موثر باشد.

“حساسیت بالای پروتکل ما ممکن است در آزمایش بیماران با عناوین ویروسی کم ، مانند بیماران بدون علامت ، یا آزمایش افراد قبل از آزاد شدن قرنطینه مفید باشد. روش ما همچنین اجازه می دهد تا چندین نمونه بیمار جمع شود ، که تعداد آزمایشات مورد نیاز را کاهش می دهد. برای جمعیتهای بزرگتر ، “ماسیمو کاپوتی ، دکتر ، نویسنده اصلی و استاد علوم پزشکی در کالج پزشکی اشمیت FAU گفت. “علاوه بر این ، آزمایش به راحتی توسط هر آزمایشگاه تحقیقاتی مجهز به حداقل تجهیزات استاندارد انجام می شود. از آنجا که بزاق می تواند به عنوان منبع قابل اعتماد ویروس مورد استفاده قرار گیرد ، می توان نمونه ها را به طور مستقل از بیماران دریافت و در TRIzol غیرفعال کرد ، بنابراین نیاز به پرسنل پزشکی و پروتکل های سطح بالاتر و امکانات ایمنی زیستی. “

با استفاده از این رویکرد جدید ، ابتدا نمونه ها ادغام و آزمایش می شوند. استخرهای مثبت به صورت جداگانه مورد آزمایش قرار می گیرند. این راه حل نسبتاً ساده منابع مورد استفاده برای آزمایش را کاهش می دهد ، اما منجر به از دست دادن حساسیت در رقت نمونه های مثبت از بیماران منفی می شود ، که به یک نمونه بسیار حساس نیاز دارد که از مواد بیولوژیکی مانند بزاق استفاده می کند ، مقادیر و می توان به راحتی برای آزمایش مجدد ذخیره کرد.

این پروتکل از معرفهای شیمیایی رایج استفاده می کند که به وفور وجود دارد و می تواند RNA با کیفیت بالا را منزوی کند ، که می تواند برای انواع سنجش ها و پروژه های تعیین توالی RNA استفاده شود. علاوه بر این ، نمونه های موجود در TRIzol را می توان در بیش از یک هفته در دمای 4 درجه سانتیگراد با حداقل تخریب و از دست دادن کمی یا بدون از دست دادن RNA ویروسی ذخیره کرد. علاوه بر این ، توانایی استفاده از نمونه های بزاقی که حساسیت یا اطمینان بیشتری نسبت به سواب های حلق دارند ، جایگزین جذابی برای نمونه است. سواب های بینی و گلو رایج ترین نمونه های مجاری هوایی فوقانی هستند که برای آزمایش تشخیصی COVID-19 استفاده می شوند. با این حال ، جمع آوری این نوع نمونه ها می تواند باعث ناراحتی ، خونریزی و نیاز به تماس نزدیک بین متخصصان بهداشت و بیماران شود و خطر انتقال را ایجاد کند.

در پروتکل های آزمایشی COVID-19 که معمولاً استفاده می شود ، ارائه دهنده خدمات بهداشتی یک سواب را از بینی یا گلو جمع می کند و آن را به یک ویال حاوی چند میلی لیتر VTM منتقل می کند. سپس نمونه به آزمایشگاه آزمایش منتقل می شود. بسته به مسافت و زمان پردازش نزدیکترین آزمایشگاه بالینی ، حمل و نگهداری از چند ساعت تا چند روز طول می کشد. CDC توصیه می کند که نمونه ها تا 72 ساعت پس از جمع آوری در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد و برای مدت طولانی تر در دمای 70- درجه سانتیگراد ذخیره شوند. تدارکات داشتن چندین نقطه نمونه برداری ، احتباس در زنجیره تامین معرف و افزایش شدید تقاضا برای آزمایش به دلیل شیوع محلی می تواند تأخیرهای غیر منتظره در پردازش نمونه را ایجاد کند.

دکتر جانت روبیشاو ، نویسنده همکار ، رئیس ارشد تحقیقات و رئیس ، گفت: “ما می توانیم انتظارات زیادی را برای آزمایش COVID-19 در آینده قابل پیش بینی داشته باشیم زیرا آزمایش عمومی و افراد بدون علامت گسترش می یابد.” گروه علوم زیست پزشکی در کالج پزشکی اشمیت FAU. “عدم کنترل همه گیری در کشورهای بسیار توسعه نیافته ، و همچنین افزایش مداوم COVID-19 در ایالات متحده ، دلایل قانع کننده ای برای افزایش تلاش برای آزمایش است. امیدواریم ترکیبی از رویکردهای آزمایش ، از جمله پروتکل هایی مانند ما ، بتواند موثرترین راه برای پر کردن شکافهای آزمایش فعلی و آینده. “

این مطالعه توسط Sean Paz تألیف شده است. کریستوفر ماور و آناستازیا ریچی؛ دانشجویان فارغ التحصیل در کالج پزشکی FAU اشمیت.

این کار با کمک مالی بنیاد فلوریدا بلو ، “توسعه الگوریتم های پیش بینی کننده عفونت COVID-19 در متخصصان مراقبت های بهداشتی FAU” پشتیبانی شد.

تاریخچه تاریخ:

مواد تهیه شده توسط دانشگاه آتلانتیک فلوریدا. اصلی ، نوشته شده توسط ژیزل گالوستیان. توجه: مطالب را می توان از نظر سبک و طول ویرایش کرد.

[ad_2]

منبع: unbox-news.ir

Leave a reply

You may use these HTML tags and attributes: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>